Agarose 凝胶

Agarose 凝胶

●配制

1. 配制适量的电泳及制胶用的缓冲液（通常是0.5×TBE或1×TAE）。

2. 根据制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。

3. 加入一定量的电泳缓冲液（总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量）。

4. 在锥形瓶的瓶口封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套，小心摇动锥形瓶，使琼脂糖充分熔化。此操作重复数次，直至琼脂糖完全熔化。必须注意，在微波炉中加热时间不宜过长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否则会引起溶液过热暴沸，造成琼脂糖凝胶浓度不准，也会损坏微波炉。熔化琼脂糖时，必须保证琼脂糖充分完全熔化，否则，会造成电泳图像模糊不清。

5. 使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时溴乙锭溶液（终浓度0.5μg/ml），并充分混匀。（注：溴乙锭是一种致癌物质。使用含有溴乙锭的溶液时，请戴好手套）。

6. 将琼脂糖溶液倒入制胶模中，然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在 3～5 mm 之间。

7. 在室温下使胶凝固（大约 30 分钟～1 小时），然后放置于电泳槽中进行电泳。

琼脂糖凝胶浓度与线形 DNA 的最佳分辨范围：

▲注意

1.用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。

2. 凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在 4℃下保存，一般可保存 2～5 天。