Salmon DNA(配制量：约100ml)

Salmon DNA(配制量：约100ml)

█  组分

10 mg/ml Salmon DNA

●配制

1. 称取鲑鱼精 2 g DNA 置于 500 ml 烧杯中，加入约 200 ml的 TE Buffer。

2. 用磁力搅拌器室温搅拌 2～4 小时，溶解后加入 4 ml 的

5 M NaCl，使其终浓度为 0.1 M。

3. 用苯酚和苯酚/氯仿各抽提 1 次。

4. 回收水相溶液后，使用 17号皮下注射针头快速吸打溶液

约 20 次，以切断 DNA。

5. 加入 2 倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。

6. 离心回收 DNA 后，溶解于 100 ml 的去离子水中，测定

溶液的 OD260值。

7. 计算溶液的 DNA 浓度后，稀释 DNA 溶液至 10 mg/ml。

8. 煮沸 10 分钟后，分装成小份（1 ml/份）。-20℃保存。

9. 使用前在沸水浴中加热 5 分钟后，迅速冰浴冷却。

▲注意

1.长期反复冻融会导致DNA断裂或降解，建议小份分装。

2.如果在溶解过程中溶液始终浑浊，说明可能含有杂质或未完全溶解，应延长搅拌时间或适当加热（<60°C）辅助溶解，最后务必过滤。