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SDS-PAGE 浓缩胶与分离胶

发布日期: 2026-07-15
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SDS-PAGE 浓缩胶与分离胶

SDS-PAGE 5% 浓缩胶配方表:

组分名称

1ml

2ml

4ml

4ml

5ml

6ml

8ml

10ml

超纯水

0.68ml

1.40ml

2.10ml

2.70ml

3.40ml

4.10ml

5.50ml

6.80ml

30% Acrylamide 储液

0.17 ml

0.33 ml

0.50 ml

0.67 ml

0.83 ml

1.00 ml

1.30 ml

1.70 ml

1.0 M Tris-HCl (pH 6.8)

0.13 ml

0.25 ml

0.38 ml

0.50 ml

0.63 ml

0.75 ml

1.00 ml

1.25 ml

10% SDS

0.01 ml

0.02 ml

0.03 ml

0.04 ml

0.05 ml

0.06 ml

0.08 ml

0.10 ml

10% 过硫酸铵(APS)

0.01 ml

0.02 ml

0.03 ml

0.04 ml

0.05 ml

0.06 ml

0.08 ml

0.10 ml

TEMED

1.0 μl

2.0 μl

3.0 μl

4.0 μl

5.0 μl

6.0 μl

8.0 μl

10.0 μl

    SDS-PAGE 分离胶配方表:

组分名称


5ml

10ml

15ml

20ml

25ml

30ml

40ml

50ml

6%

超纯水

2.6 ml

5.3 ml

7.9 ml

10.6ml

13.2ml

15.9ml

21.2ml

26.5ml

30% Acrylamide 储液

1.0 ml

2.0 ml

3.0ml

4.0 ml

5.0ml

6.0ml

8.0ml

10.0ml

1.5 M Tris-HCl(pH 8.8)

1.3 ml

2.5 ml

3.8ml

5.0 ml

6.3ml

7.5ml

10ml

12.5ml

10% SDS

0.05ml

0.1 ml

0.15ml

0.2 ml

0.25ml

0.3 ml

0.4 ml

0.5 ml

10% 过硫酸铵(APS)

0.05ml

0.1 ml

0.15ml

0.2 ml

0.25ml

0.3ml

0.4ml

0.5 ml

TEMED

4.0 μl

8.0 μl

12ul

16.0μl

20μl

24μl

32μl

40μl

组分名称


5ml

10ml

15ml

20ml

25ml

30ml

40ml

50ml

8%

超纯水

2.3 ml

4.6 ml

6.9ml

9.3 ml

11.6ml

13.9ml

18.5 ml

23.2ml

30% Acrylamide 储液

1.3 ml

2.7 ml

4.0 ml

5.3 ml

6.7 ml

8.0 ml

10.7 ml

13.3ml

1.5 M Tris-HCl(pH 8.8)

1.3 ml

2.5 ml

3.8 ml

5.0 ml

6.3 ml

7.5 ml

10.0 ml

12.5ml

10% SDS

0.05 ml

0.1 ml

0.15 ml

0.2 ml

0.25 ml

0.3 ml

0.4 ml

0.5 ml

10% 过硫酸铵(APS)

0.05ml

0.1 ml

0.15 ml

0.2 ml

0.25 ml

0.3 ml

0.4 ml

0.5 ml

TEMED

3.0 μl

6.0 μl

9.0 μl

12.0 μl

15.0 μl

18.0 μl

24.0 μl

30.0μl

组分名称


5ml

10ml

15ml

20ml

25ml

30ml

40ml

50ml

10%

超纯水

1.9 ml

3.9 ml

5.9ml

7.9 ml

9.9ml

11.9ml

15.8ml

19.7ml

30% Acrylamide 储液

1.7 ml

3.3 ml

5.0 ml

6.7 ml

8.3 ml

10.0ml

13.3ml

16.7 ml

1.5 M Tris-HCl(pH 8.8)

1.3 ml

2.5 ml

3.8 ml

5.0 ml

6.3 ml

7.5 ml

10.0ml

12.5 ml

10% SDS

0.05ml

0.1 ml

0.15 ml

0.2 ml

0.25ml

0.3 ml

0.4 ml

0.5 ml

10% 过硫酸铵(APS)

0.05ml

0.1 ml

0.15ml

0.2 ml

0.25ml

0.3 ml

0.4 ml

0.5 ml

TEMED

2.0 μl

4.0 μl

6.0 μl

8.0 μl

10.0 μl

12.0 μl

16.0 μl

20.0 μl

组分名称


5ml

10ml

15ml

20ml

25ml

30ml

40ml

50ml

12%

超纯水

1.6 ml

3.3 ml

4.9 ml

6.6 ml

8.2 ml

9.9 ml

13.2 ml

16.5 ml

30% Acrylamide 储液

2.0 ml

4.0 ml

6.0 ml

8.0 ml

10.0 ml

12.0ml

16.0 ml

20.0 ml

1.5 M Tris-HCl(pH 8.8)

1.3 ml

2.5 ml

3.8 ml

5.0 ml

6.3 ml

7.5 ml

10.0 ml

12.5 ml

10% SDS

0.05ml

0.1 ml

0.15ml

0.2 ml

0.25 ml

0.3 ml

0.4 ml

0.5 ml

10% 过硫酸铵(APS)

0.05ml

0.1 ml

0.15ml

0.2 ml

0.25 ml

0.3 ml

0.4 ml

0.5 ml

TEMED

2.0 μl

4.0 μl

6.0 μl

8.0 μl

10.0 μl

12.0 μl

16.0 μl

20.0 μl

组分名称


5ml

10ml

15ml

20ml

25ml

30ml

40ml

50ml

15%

超纯水

1.1ml

2.3ml

3.4ml

4.6ml

5.7ml

6.9ml

9.2ml

11.5ml

30% Acrylamide 储液

2.5 ml

5.0ml

7.5 ml

10.0 ml

12.5ml

15.0ml

20.0ml

25.0ml

1.5 M Tris-HCl(pH 8.8)

1.3ml

2.5ml

3.8ml

5.0ml

6.3ml

7.5ml

10.0ml

12.5ml

10% SDS

0.05 ml

0.1ml

0.15ml

0.2ml

0.25ml

0.3 ml

0.4 ml

0.5ml

10% 过硫酸铵(APS)

0.05 ml

0.1ml

0.15ml

0.2ml

0.25ml

0.3 ml

0.4 ml

0.5ml

TEMED

2.0 μl

4.0 μl

6.0 μl

8.0 μl

10.0μl

12.0μl

16.0μl

20.0 μl

注意

1.  超纯水:作为无杂质溶剂,提供均一的液相分散介质,保障凝胶聚合与电泳过程无外源干扰。

2.  30% Acrylamide 储液(丙烯酰胺 - 甲叉双丙烯酰胺):提供凝胶的单体与交联剂,聚合后形成三维多孔网状结构,为蛋白质分离提供分子筛效应。

3.  1.0 M Tris-HCl(pH 6.8)(仅浓缩胶用):构建浓缩胶的缓冲体系,维持 pH 稳态,与分离胶的 pH 梯度共同促成蛋白质的浓缩效应。

4.  1.5 M Tris-HCl(pH 8.8)(仅分离胶用):构建分离胶的高 pH 缓冲体系,为蛋白质电泳提供稳定的电荷环境,确保分离的准确性。

5.  10% SDS(十二烷基硫酸钠):阴离子去污剂,使蛋白质变性并结合负电荷,消除其天然电荷与构象差异,实现蛋白质按分子量的电荷密度均一化分离。

6.  10% 过硫酸铵(APS):自由基引发剂,在碱性条件下分解产生氧自由基,触发丙烯酰胺的自由基聚合反应。

7.  TEMED(四甲基乙二胺):亲核性催化剂,加速 APS 的自由基生成,调控凝胶聚合速