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Technical articlePCR跑完,阴性对照却冒出了阳性条带;辛辛苦苦几周的数据,被莫名出现的扩增曲线全部推翻——实验室里最让人崩溃的瞬间之一,就是核酸污染。
酒精喷洒后挥发,残留的核酸重新附着在表面恢复活性;紫外照射对边角无能为力,对短片段效果更差;高温高压又没法处理精密仪器。有没有一种真正靠谱的解决方案?
核酸清除剂就是答案。本文将系统梳理核酸清除剂的核心作用原理、配方组成、配制方法及关键注意事项。
核酸清除剂是一种专门降解DNA和RNA分子的喷雾型试剂,能在数分钟内将核酸片段彻底断链清除,从根源上杜绝PCR假阳性。
核心作用机制:
解离:表面活性剂降低表面张力,将吸附在器材表面的核酸“拽”下来
降解:氧化剂产生活性氧自由基,破坏核酸的碱基结构与磷酸骨架,使之失去扩增模板活性
市面上核酸清除剂的配方虽有差异,但核心功能模块基本相同。以下为经典配方体系:
| 成分类别 | 常见原料 | 核心作用 | 参考配比 |
|---|---|---|---|
| 氧化剂 | 次氯酸钠、过氧化氢(选其一)、过氧化脲 | 产生活性氧自由基,破坏核酸的碱基结构与磷酸骨架 | 0.1%~10% |
| 表面活性剂 | SDS、Tween、十二烷基二甲基氧化胺 | 降低表面张力,将吸附的核酸从器材表面“拽”下来 | 1%~8% |
| 螯合剂 | EDTA、柠檬酸 | 螯合金属离子,抑制残留核酸酶活性 | 1~15 mM |
| 酸碱调节剂 | 氢氧化钠、有机酸 | 创造适宜降解的pH环境,辅助核酸变性 | 0.5%~1.0% |
| 溶剂 | 去离子水、乙醇 | 作为载体,保证各组分均匀分散 | 余量 |
氢氧化钠(NaOH)
表面活性剂(SDS或Tween)
EDTA溶液
次氯酸钠或过氧化氢
去离子水
| 步骤 | 操作 | 关键说明 |
|---|---|---|
| ① 配制碱性溶液 | 将氢氧化钠(0.5%~1.0%)溶于去离子水中,搅拌至完全溶解 | — |
| ② 加入表面活性剂 | 缓慢加入SDS或Tween(1%~8%),持续搅拌至溶解 | — |
| ③ 加入螯合剂 | 加入EDTA溶液(终浓度1~15 mM),混匀 | — |
| ④ 最后加氧化剂 | 待溶液完全冷却至室温(<30℃)后,缓慢加入次氯酸钠或过氧化氢(0.1%~10%),室温搅拌至均匀 | 氧化剂必须最后加,提前混合会失效 |
| ⑤ 定容与分装 | 加去离子水定容,转入喷壶备用 | — |
| 控制点 | 要求/措施 | 原因 |
|---|---|---|
| 避光保存 | 配好的溶液避光保存 | 氧化剂见光易分解失效 |
| 有效期 | 次氯酸钠类开封后建议30天内用完 | 氧化剂活性随时间下降 |
| 作用时间 | 喷洒后静置5~10分钟再擦拭 | 给降解反应留足时间 |
| 适用场景 | 移液器、安全柜、离心管架、PCR仪表面等 | 精密仪器无法高温高压处理 |
| 异常现象 | 可能原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| 喷洒后仍出现PCR假阳性 | 清除剂浓度不足或作用时间不够 | 检查氧化剂浓度;延长静置至10分钟 |
| 溶液漂白/腐蚀仪器表面 | 氧化剂浓度过高 | 按推荐比例稀释;敏感材质慎用 |
| 配制后降解效果差 | 氧化剂提前加入或保存不当 | 严格按顺序配制;避光保存 |
| 清除剂开封后失效 | 超过有效期 | 次氯酸钠类30天内用完 |

自行配制核酸清除剂涉及氧化剂浓度控制、表面活性剂配比、避光保存——每一步都影响降解效果。更不用说配制过程中的原料采购和有效期管理。
杭州富沃克生物科技有限公司推出的科研专用核酸污染清除剂,采用专用核酸降解配方,不含强酸强碱与腐蚀性残留,可快速降解双链DNA、单链DNA、RNA、质粒片段、扩增产物等各类核酸污染物,彻底破坏核酸碱基结构与扩增模板活性,3~10分钟即可完成清除。产品适配PCR仪、生物安全柜、移液器、离心管架等各类场景,省去自行配制的繁琐与风险。
| 产品名称 | 规格 | 产品货号 |
|---|---|---|
| 核酸清除剂 | 100mL / 300mL / 600mL | HSQ606-01 |
厂家联系微信号:19850855600
邮箱:support@fwkbio.com
官网链接:核酸清除剂-杭州富沃克生物科技有限公司
参考文献
[1] 青岛立见诊断技术发展中心. 一种核酸祛除剂: CN110684605B[P]. 2021-08-10.
[2] 思凝一云. 核酸清除剂 Nucleic Acid Cleaner[EB/OL]. 科创中国, 2023-11-09.
[3] 王占奎, 杨云华, 王敏, 等. 一种核酸、核酸酶污染清除剂及其制备方法和应用: CN118421404A[P]. 2024-08-02.
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