DNase I

脱氧核糖核酸酶 I（DNase I）
高活性专用核酸酶 · 精准去除DNA污染 · 适配RNA纯化、蛋白制备与分子生物学研究

产品概述

DNase I（Deoxyribonuclease I，脱氧核糖核酸酶I）是一种高度保守的核酸内切酶，能够以内切方式水解单链或双链DNA，生成含有5'-磷酸基团和3'-羟基末端的寡核苷酸。作为一种经典的“分子剪刀”，DNase I在核酸的研究、分析和操作中占据着关键地位。

本产品为高活性RNase-free DNase I，具备精准酶切与靶向降解能力，酶切特异性强且无蛋白水解活性，可有效去除非目标核酸杂质。产品活性稳定，耐受多类实验条件，适配核酸提取、蛋白纯化等多场景前处理，兼容各类纯化体系，操作便捷，大幅提升样本纯度与实验结果可靠性。

核心优势

一、精准酶切，特异性强

DNase I能够同等程度地随机分解单链或双链DNA，产生具有5'-磷酸基团和3'-羟基末端的寡核苷酸产物。其活性严格依赖于钙离子（Ca²⁺），并能被镁离子（Mg²⁺） 或二价锰离子（Mn²⁺） 激活：

• Mg²⁺存在条件下：DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点

• Mn²⁺存在条件下：DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端或1-2个核苷酸突出的粘末端

本产品无蛋白水解活性，无RNase残留，可特异性去除DNA而对RNA无影响，是RNA样品处理的理想工具酶。

二、高纯度，无RNase污染

优质DNase I产品经过严格纯化，确保不含RNase活性。质量控制标准规定，5U酶与1.6μg MS2 RNA在37℃反应4小时，RNA电泳谱带应无变化，这是评价产品适用性的核心指标。本产品不含其它DNA内切酶和外切酶，从源头杜绝外源酶对样本的干扰。

三、活性稳定，耐受多类实验条件

本产品活性稳定，在多种实验条件下均可保持高效酶切能力。活性定义明确：1个活力单位（U）指在37℃条件下，10分钟完全降解1μg pBR322 DNA所需的酶量。每μg RNA对应1U酶量是经验优化的最佳比例。

四、兼容性强，适配多类纯化体系

DNase I可作用于单链DNA、双链DNA、染色质及DNA-RNA杂交链，底物多样性优异。兼容各类核酸纯化体系与蛋白纯化流程，适配多种实验场景的前处理需求。

五、操作便捷，即用即取

本品为RNase-free级别，提供Reaction Buffer（10×） 及EDTA失活溶液。无需复杂的预处理步骤，即取即用，大幅简化实验流程。

技术参数

核心应用场景

一、RNA样本中基因组DNA污染去除（核心应用）

在RNA提取过程中，基因组DNA（gDNA）污染难以完全避免。gDNA残留会导致RT-qPCR假阳性信号，严重影响定量准确性。本产品可在RNA提取期间、RNA提取后或反转录前高效消化gDNA。

标准操作流程：

1. 冰上解冻RNA样本

2. 配制反应体系：每1–2μg RNA加入1U DNase I

3. 37℃孵育30分钟，充分降解gDNA

4. 加入2.5μL 25mM EDTA，65–75℃加热5–10分钟双重灭活DNase I

二、体外转录后模板DNA去除

在mRNA疫苗生产、体外转录合成mRNA或siRNA时，DNA模板残留会触发免疫反应或干扰功能研究。DNase I可高效去除模板DNA，保证RNA疫苗的质量与安全性。

三、DNase I足迹实验（DNase I Footprinting）

用于研究DNA-蛋白质相互作用。蛋白质结合在DNA片段上，可保护结合部位不被DNase I破坏，DNA分子经酶切后遗留下该片段（即“足迹”），进而确定其序列。

四、缺口平移（Nick Translation）

DNase I与E.coli DNA Polymerase I联合作用，用于DNA探针的标记。

五、细胞凋亡TUNEL检测

在TUNEL（末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记）检测中，用于部分剪切基因组DNA作为阳性对照。

六、染色质可及性分析（DNase-seq/ATAC-seq）

DNase I用于切割开放染色质区域，通过测序鉴定基因组的可及性位点，是表观遗传研究的关键步骤。

七、蛋白制备中去除DNA

在蛋白纯化流程中，DNase I可用于从蛋白制备物中去除DNA。

八、产生DNA随机片段文库

用于构建DNA随机片段文库，适配NGS建库等应用。

失活与抑制

• 失活方法：加入EDTA至终浓度2.5mM后，65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可使DNase I失活。

• 抑制因素：金属离子螯合剂、毫摩尔/升浓度的锌离子、0.1% SDS、DTT/巯基乙醇等还原剂、50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。

品质保障

• 经严格纯化工艺处理，不含RNase

• 不含其它DNA内切酶和外切酶

• 每批次产品经严格质检，活性稳定可靠

• 提供Reaction Buffer（10×） 及EDTA失活溶液，配套齐全

• 仅限科研使用，严禁用于临床诊断或治疗

使用与储存建议

• 储存条件：建议-20℃保存。酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

• 稀释方法：如需稀释，可用酶储存液（50mM Tris-acetate pH7.5，10mM CaCl₂，50%甘油）进行稀释。

• 避免反复冻融：建议首次使用时根据实验需求分装，避免频繁温度变化影响长期稳定性。

• 配套缓冲液：必须使用配套的10×DNase I Buffer，其含有Ca²⁺等必需组分。

• 避免交叉污染：操作时应使用专用的RNase-free耗材和试剂。

• 安全提示：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

淘宝购买链接：脱氧核糖核酸酶I /DNA酶/ DNase I 试剂200 U 去除DNA RNase Free

厂家联系微信号（同手机号）：19850855600

或扫二维码添加微信，可免费领取试用装（包邮）：