



产品概述
qPCR Mix(实时荧光定量PCR预混液)——即用型高效预制体系,精准定量分析的理想之选
产品概述
qPCR Mix是实时荧光定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)实验的核心预制试剂,是一款经过全面优化的即用型2×浓度预混液。它将qPCR反应所需的所有通用组分预先混合在一起,旨在简化实验操作、减少人为误差,并保证反应的高特异性和卓越的重复性。
本产品专为科研精密分析与院校实验教学双场景设计,适用于染料法(SYBR Green I)和探针法(如TaqMan)两种主流qPCR技术平台。产品含有热启动DNA聚合酶、优化的PCR缓冲体系、dNTPs、Mg²⁺、荧光染料或探针以及校正染料(ROX)等全套扩增组分。使用时,只需加入模板、引物(及探针)和去离子水,即可进行反应,可最大限度地减少人为误差、节约PCR实验操作时间、降低污染几率。
核心优势
一、即用型2×浓度预混液,操作极简
本产品为2×浓度的即用型预混液,除引物和模板外,已包含qPCR所需的所有组分。使用时只需加入模板、引物和水,使其工作浓度为1×,即可进行反应。这一设计大幅简化了实验操作流程,有效避免了多步加样带来的繁琐与误差,显著节约实验准备时间。
二、高灵敏度与特异性,精准检测低丰度靶标
本产品采用抗体法热启动Taq DNA聚合酶。在PCR反应的预变性步骤中,抗体被加热失活,从而在预变性之后才释放Taq酶的活性。这一机制有效抑制了低温条件下引物非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增,大大提高了PCR反应的特异性、灵敏度和定量检测的准确性。对于低丰度基因(Ct值30-35)的检测或高GC含量(≤78%)的复杂模板,本产品均能实现高效、特异的扩增。
三、广泛的平台兼容性与数据稳定性
本产品预混了通用参比染料(ROX),适用于各种型号的qPCR仪器,无需根据仪器类型额外调整ROX浓度。反应体系配制后在室温放置48小时仍具有优异的扩增性能,为高通量操作提供了极大的便利和保障。产品经过严苛的稳定性测试,经20次反复冻融或在37℃条件下保存15天,性能无明显下降。
技术原理
qPCR Mix的工作原理基于荧光标记技术,通过实时监测PCR扩增过程中荧光信号的累积,实现对起始模板的定量分析。
一、SYBR Green染料法
SYBR Green I是一种能够特异性结合双链DNA(dsDNA)的荧光染料。在PCR反应中,随着扩增产物(双链DNA)的不断累积,SYBR Green I染料嵌入其中,发出荧光。荧光信号的强度与PCR产物的数量成正比,通过实时监测荧光强度,即可实现对目标基因的准确定量。本方法操作简便、成本较低,适用于基因表达分析等常规定量场景。
二、TaqMan探针法
探针法利用一条与目标序列特异性结合的寡核苷酸探针。该探针的5'端标记有荧光基团(如FAM),3'端标记有淬灭基团(如BHQ1)。当探针完整时,荧光基团被淬灭基团抑制,不产生荧光。在PCR延伸阶段,Taq酶的5'→3'外切酶活性会切割结合在模板上的探针。荧光基团与淬灭基团分离,产生可被检测的荧光信号。每经过一个循环,便有更多荧光基团被释放,荧光强度与新合成的目标片段数量成正比。探针法特异性极高,尤其适合低丰度靶标或单核苷酸多态性(SNP)检测。
产品规格
| 项目 | 详情 |
|---|---|
| 产品浓度 | 2× 预混液 |
| 保存条件 | -20℃ 长期保存;频繁使用可暂存于4℃ |
| 运输条件 | 干冰运输 |
| 产品规格 | 1mL / 5mL / 25mL 等多种规格可选 |
核心应用场景
| 应用场景 | 具体用途 |
|---|---|
| 基因表达分析 | 检测不同组织、细胞或处理条件下目标基因mRNA的表达水平变化 |
| 病原体检测 | 快速、灵敏地检测病毒(如新冠病毒)、细菌等病原体的核酸 |
| 绝对定量分析 | 通过标准曲线对样本中的目标核酸进行绝对拷贝数定量 |
| 基因分型与SNP检测 | 用于单核苷酸多态性(SNP)分析、等位基因区分等 |
| miRNA分析 | 用于microRNA等小RNA的定量检测 |
| siRNA验证 | 验证RNA干扰(RNAi)实验中siRNA的沉默效率 |
品质保障
采用抗体法热启动Taq DNA聚合酶,有效抑制非特异性扩增
ISO 9001质量管理体系生产,批间一致性高
每批次产品经严格质检,品质稳定可靠
本产品仅限实验室科研与教学用途,不可用于临床诊断
使用与储存建议
解冻与混匀:从-20℃取出后,于室温或冰上解冻,并充分颠倒混匀后使用。请勿涡旋振荡,以免产生气泡影响反应。
反应体系配制:推荐在冰上进行体系配制。根据实验需求,将2× qPCR Mix、引物、模板和无核酸酶水混合至1×工作浓度。
分装保存:为避免反复冻融,建议将产品分装成单次使用量后,于-20℃保存。
ROX选择:根据所使用的qPCR仪器型号,选择含高浓度ROX(High ROX) 或低浓度ROX(Low ROX) 的相应产品。
安全提示:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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