LB/Amp/X-Gal/IPTG ( 配制量：1L)

LB/Amp/X-Gal/IPTG ( 配制量：1L)

█组分

●配制

1.称取10g Tryptone、5g YeastExtract 和10g NaCl，置于1L烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.滴加5N NaOH（约0.2ml），调节pH值至7.0。

4.加去离子水将培养基定容至1L后，加入15gAgar。

5.高温高压灭菌后，冷却至60℃保存。

6.加入1mlAmpicillin（100mg/ml）、1mlIPTG（24mg/ml）、2mlX-Gal（20mg/ml）后均匀混合。

7.铺制平板（30～35ml培养基/90mm培养皿）。

8.4℃避光保存。

▲注意

1.添加剂-20℃储存，X-Gal全程避光操作，使用前解冻摇匀。

2.60℃时无菌添加试剂，专人专管移液管防交叉污染，加后快速摇匀。

3.平板凝固后倒置，4℃避光密封保存，尽快使用，防污染及X-Gal失效。