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Technical article基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
recA | 58 min | 表达ATP依赖型DNA重组酶,参与λ-噬菌体溶原重组与DNA放射性损伤修复 | 使同源或异源DNA重组不能进行,保持插入DNA的稳定性,有利于DNA转化 | |||
recB | 61 min | 表达ATP依赖型DNase和核酸外切酶V亚基,辅助recA的DNA重组酶功能 | DNA重组和修复功能丧失,保证外源DNA的稳定,有利于DNA转化 | |||
recC | 61 min | 表达核酸外切酶V、ATP依赖型核酸内切酶、解旋酶及ATP酶 | DNA重组功能缺失,保证外源DNA的稳定性 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
dam | 74 min | 表达DNA腺嘌呤甲基化酶,催化GATC序列中A的甲基化,保护DNA免受限制酶切断 | 腺嘌呤不被甲基化,易于获得非甲基化质粒 | |||
dcm | 43 min | 表达胞嘧啶甲基化酶,识别CCWGG序列并使第二个C甲基化 | 胞嘧啶不被甲基化,易于获得非甲基化质粒 | |||
mcrA | 26 min | 表达防御酶,特异性分解外来DNA上被甲基化的胞嘧啶序列 | 对外来甲基化胞嘧啶失去作用,有利于限制酶及甲基化酶克隆体的稳定 | |||
mcrB,C | 98 min | 表达特异性蛋白,对外来DNA中甲基化胞嘧啶进行识别和切断 | 对外来DNA的防御作用缺失,对质粒转化有利 | |||
mrr | 98 min | 限制被甲基化外源DNA介入,对多种限制酶及甲基化酶活性有抑制作用 | 可用于含有N⁶A和CCWGG的DNA转化,也可用于限制酶和甲基化酶克隆体 | |||
hsdM | 99 min | 表达DNA甲基化酶,使DNA双链上的AA双核苷酸甲基化 | 细菌DNA不被甲基化,易于获得非甲基化质粒 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
mutS | 59 min | 识别DNA错配序列并修复,防止基因突变 | DNA错配序列不能修复,容易发生基因突变,有利于利用点突变进行基因改造 | |||
mutT | 3 min | 特异性降解8-OXO-dGTP,防止A-T转换成G-C的突变 | 8-OXO-dGTP浓度升高,A-C突变几率增大,有利于点突变 | |||
dut | 82 min | 表达脱氧尿嘧啶三磷酸苷酸水解酶,维持dUTP低浓度 | dUTP浓度升高,尿嘧啶易掺入DNA,发生A→U突变,有利于点突变 | |||
ung | 56 min | 表达尿嘧啶-N-糖苷酶,识别并去除DNA上突变的尿嘧啶残基 | 突变修复功能缺失,有利于点突变 | |||
uvrB | 18 min | 表达核酸外切酶b亚基,具有DNA切补功能,修补紫外线损伤 | 切除变异碱基活性缺失,有利于点突变 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
hsdR | 99 min | 表达I型限制酶EcoK(K12株)或EcoB(B株),对外来DNA严格限制 | I型限制酶活性缺失,有利于外来基因导入及质粒转化 | |||
hsdS | 99 min | 表达特异性蛋白,负责hsdR和hsdM对DNA序列的特异识别 | hsdR和hsdM不能正确识别特异DNA序列,保持插入DNA的稳定性 | |||
endA | 64 min | 表达非特异性核酸内切酶,使DNA双链解开 | 外源DNA更加稳定,提取的质粒纯度更高 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
supE | 16 min | 表达阻遏蛋白与终止密码子UAG结合,使蛋白质合成停止 | 即使遇到UAG终止密码子,蛋白质合成仍能继续,使UAG编码谷氨酰胺 | |||
supF | 27 min | 表达阻遏蛋白与终止密码子UAG结合 | 遇到UAG终止密码子蛋白质合成继续,使UAG编码酪氨酸 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
gyrA | 48 min | 表达DNA促旋酶A亚基,负责DNA解旋和回旋 | 萘啶酮酸和荧光喹啉失去结合目标,菌株具有抗性 | |||
rpsL | 73 min | 表达核糖体30S亚基中的S12蛋白,作用于翻译开始阶段 | 链霉素失去结合位点,菌株具有链霉素抗性 | |||
Tn5 | 转座子 | 载有卡那霉素抗性基因的转座子 | 菌株获得卡那霉素抗性 | |||
Tn10 | 转座子 | 载有四环素抗性基因的转座子 | 菌株获得四环素抗性 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
lacZ | 8 min | 表达β-半乳糖苷酶,分解乳糖为半乳糖苷 | β-半乳糖苷酶活性缺失,可用于菌株筛选和纯化 | |||
lacZΔM15 | 8 min | 表达β-半乳糖苷酶α片断,突变后无活性 | 配合带有lacZ(α片断)的载体,可通过蓝白菌落进行克隆鉴定 | |||
lacI | 8 min | 表达阻遏蛋白,抑制lac操纵子 | 操纵子几乎完全被抑制,有利于目的基因表达的人为控制 | |||
ara | 1 min | 表达阿拉伯糖代谢所需的各种酶 | 细胞不能利用阿拉伯糖进行能量代谢,可用于菌株筛选 | |||
mtl | 81 min | 表达甘露醇代谢相关酶 | 甘露醇代谢不能进行,以甘露醇为唯一碳源时不能生长 | |||
xyl | 80 min | 表达木糖代谢相关酶 | 细胞不能以木糖作为碳源进行能量代谢 | |||
gal | 17~164 min | 表达半乳糖代谢所需的各种酶类及调节蛋白 | 不能直接利用半乳糖作为碳源,可通过最小培养基添加半乳糖进行筛选 | |||
srl | 58 min | 表达山梨醇代谢相关酶 | 对山梨醇的吸收和利用受阻,以山梨醇为唯一碳源时不能生长 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
gpt | 6 min | 表达鸟嘌呤-次黄嘌呤磷酸核糖转移酶 | 鸟嘌呤不能生物合成,对菌株筛选有利 | |||
thyA | 61 min | 表达胸苷酸合成酶,参与胸腺嘧啶代谢 | 可利用胸腺嘧啶进行菌株筛选 | |||
asd | 76 min | 表达天门冬氨酸半醛脱氢酶 | 天门冬氨酸合成受阻,最小培养基培养需添加天门冬氨酸 | |||
leuB | 2 min | 表达3(B)-异丙基苹果酸脱氢酶 | 亮氨酸生物合成受阻,最小培养基培养需添加亮氨酸 | |||
proA | 6 min | 表达γ-谷氨酸磷酸还原酶 | 脯氨酸生物合成受阻,最小培养基培养需添加脯氨酸 | |||
proB | 6 min | 表达谷氨酸盐-5-磷酸激酶 | 脯氨酸合成受阻,最小培养基培养需添加脯氨酸 | |||
trpR | 100 min | 表达trp操纵子的阻遏蛋白 | trp操纵子阻遏蛋白不能表达,有利于trp操纵子的蛋白表达 | |||
lys | 17~191 min | 包括lysA、lysC、lysP、lysT、lysX等基因 | 赖氨酸生物合成不能进行,最小培养基培养需添加赖氨酸 | |||
metB | 90 min | 表达胱硫醚γ-合成酶 | 甲硫氨酸生物合成受阻,最小培养基培养需添加甲硫氨酸 | |||
cysB | 28 min | 表达阻遏蛋白,调节半胱氨酸生物合成 | 基因的变异有利于半胱氨酸的生物合成 | |||
thr | 0 min | 包括thrA、thrB和thrC,表达苏氨酸合成相关酶 | 细胞不能合成苏氨酸,最小培养基培养需添加苏氨酸 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
bioH | 18 min | 催化前生物素到生物素的转化;对庚二酰CoA有优先阻害作用 | 细胞不能自身合成生物素,最小培养基必须添加生物素 | |||
thi | 90 min | 包含thiA、thiB、thiC、thiD、thiK、thiL等,参与硫胺素合成 | 硫胺素(VB1)生物合成不能进行,最小培养基必须添加硫胺素 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
lon | 10 min | 表达ATP依赖型蛋白分解酶,对异型蛋白质有特异性分解作用 | 异型蛋白质分解酶不能表达,有利于保持克隆体目的蛋白的稳定 | |||
ompT | 13 min | 表达特异性外膜蛋白分解酶,分解含铁肠菌素受体蛋白 | 膜结合性蛋白分解酶活性缺失,有利于融合蛋白的表达 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
tonA / fhuA | 3.6 min | 表达外膜受体蛋白,负责铁化合物运输 | 铁离子吸收受阻,对某些抗菌素及噬菌体更敏感,有利于质粒转化 | |||
tsx | 9 min | 表达T1噬菌体和大肠杆菌素K的受体蛋白 | 噬菌体及大肠杆菌素对细胞的侵噬变得困难,有利于细胞基因组稳定 | |||
cysA | 52 min | 表达硫酸盐/硫代硫酸盐转移蛋白 | 半胱氨酸生物合成受影响,培养时需添加半胱氨酸 | |||
基因型 | 基因位置 | 功能说明 | 变异影响与应用价值 | |||
deoR | 19 min | 表达deo操纵子的阻遏蛋白,调控DNA代谢所需酶类 | 宿主细胞合成大量dCTP,可选择性改善大分子DNA转化 | |||
traD | F因子 | 在大肠杆菌结合及F因子传递中发挥作用 | F因子不能在细胞间转移,保证宿主细胞和导入质粒的稳定性 | |||
hflC | 95 min | 表达高效溶原蛋白,使噬菌体DNA插入基因组 | 避免溶原反应,保持宿主基因组及插入质粒的稳定 | |||
minA, B | 10, 26 min | 促进微细胞(不含DNA)形成 | 阻害微细胞形成,提高克隆体表达效率 | |||
relA | 63 min | 松弛调节基因,调节RNA合成 | 对目的基因的转录有利 | |||
glnV | 16 min | 专门转录谷氨酸tRNA | 以谷氨酸为主的蛋白质合成受阻 | |||
tyrT | 27 min | 专门转录酪氨酸tRNA | 以酪氨酸为主的蛋白质合成受阻 | |||
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