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Technical articleRNA提取实验做到最后一步，OD值难看、跑胶条带弥散、下游实验一塌糊涂——前面的辛苦全部归零。这时师兄师姐通常会甩过来一句话：“用8M LiCl再过一遍。”
8M氯化锂溶液是分子生物学实验室中低调但高效的“RNA精纯利器”——在高浓度锂离子作用下，RNA选择性沉淀，而DNA、蛋白质和游离核苷酸基本留在上清。本文将系统梳理8M LiCl的核心原理、配制全流程、关键质控点及使用注意事项。
8M LiCl最经典的用途是RNA的选择性二次沉淀——在初次沉淀（异丙醇或乙醇）获得RNA粗提物后，用8M LiCl进行“精纯化”，有效去除残留的DNA和蛋白质。
关于浓度的补充说明：
该法对大分子RNA（如rRNA、mRNA） 沉淀效率较高
小分子RNA（如tRNA、5S rRNA） 在4M LiCl浓度下主要保留在上清中；当LiCl浓度升至8M时，小分子RNA可部分共沉淀
如果你的实验目标是回收所有RNA（包括小RNA） ，需谨慎评估此法是否适用
其他应用场景：
染色质免疫沉淀（ChIP）洗涤缓冲液
RIPA洗涤缓冲液
| 原料 | 规格要求 | 用量 |
|---|---|---|
| 氯化锂（LiCl） | 分子生物学级，纯度≥99% | 339.12 g（8 × 42.39） |
| 超纯水 | DEPC处理，18 MΩ·cm，不含核酸酶 | 定容至1000 mL |
| 控制点 | 要求 | 说明 |
|---|---|---|
| 核酸酶残留 | DNase/RNase活性未检出 | 用于RNA实验的LiCl溶液必须不含DNA酶和RNA酶——否则沉淀下来的RNA可能已被悄然降解 |
| 原料纯度 | 分子生物学级，纯度≥99% | 杂质可能干扰下游实验 |
| 溶剂 | DEPC处理水 | 灭活残留核酸酶 |
| 步骤 | 操作 | 关键说明 |
|---|---|---|
| ① 计算称量 | 称取339.12 g LiCl | 氯化锂在20℃溶解度为832 g/L——339 g/L完全可溶 |
| ② 溶解 | 取约800 mL DEPC处理水于烧杯中，磁力搅拌器开启，缓慢分批加入LiCl固体 | 溶解过程强烈放热，溶液温度明显升高——必须待溶液完全冷却至室温后再进行下一步定容 |
| ③ 定容 | 冷却至室温后，加DEPC处理水定容至1 L | 热胀冷缩会导致定容体积不准——定容时温度必须准确 |
| ④ pH记录 | 用pH计检测并记录溶液pH值（通常在5~7之间） | 作为批次质控记录，便于后续问题追溯 |
| ⑤ 除菌过滤 | 使用0.22 μm滤膜过滤除菌 | 最安全、最稳定的方法 |
| ⑥ 分装 | 按单次实验用量分装（如50 mL或100 mL/瓶） | 避免反复取用引入污染 |
| ⑦ 保存 | 4℃保存，一年内有效 | 操作时戴手套、穿实验服，注意无菌 |
| 灭菌方式 | 推荐度 | 原因 |
|---|---|---|
| 0.22 μm滤膜过滤除菌 | ✅ 强烈推荐 | 最安全、最稳定，不改变浓度 |
| 高温高压灭菌 | ❌ 不优先推荐 | ①高压下水分蒸发导致浓度漂移 ②玻璃瓶可能析出杂质 ③无法精确控温 ④LiCl具吸湿性，灭菌后冷却可能吸入水分 |
| 异常现象 | 原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| RNA沉淀后有大量白色不溶物 | DNA残留或盐共沉淀 | 检查LiCl浓度是否准确；延长溶解时间或增加洗涤步骤 |
| 小RNA回收率低 | 小RNA在LiCl中部分保留在上清 | 如需回收小RNA，评估此法是否适用或改用乙醇沉淀 |
| 配制时溶液剧烈升温 | LiCl溶解放热 | 缓慢分批加入，待冷却后再定容 |
| 下游实验失败 | LiCl残留抑制酶反应 | 增加乙醇洗涤次数（至少2次），确保沉淀充分干燥 |
| 溶液存放后出现沉淀 | 温度变化或微生物污染 | 弃用，重新配制 |
自己配制8M LiCl溶液，称量、溶解（放热需谨慎）、定容（必须冷却至室温）、过滤——一套流程下来半天没了。更怕的是明明每一步都按要求做了，跑胶还是翻车——问题可能出在试剂纯度、水质，或操作中引入了核酸酶。
杭州富沃克生物科技有限公司推出的8M LiCl溶液（DNase/RNase free），采用分子生物学级LiCl、DEPC处理超纯水配制，经0.22μm滤膜过滤除菌，每批次提供COA（质检报告），确保DNase/RNase活性低于检出限。多浓度与规格可选，支持小规格试用装采购。
| 产品名称 | 规格 | 产品货号 |
|---|---|---|
| 8mol/L 氯化锂溶液（科研试验用，无菌） | 50mL / 100mL / 500mL | LVL606-01—LVL606-15 |
| 另有1%、5%、1mol/L、2mol/L浓度可选 | — | — |
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参考文献
[1] 碧云天生物技术. 8M LiCl (DNase/RNase free)(氯化锂溶液)(ST498-100ml).
[2] Sigma-Aldrich. Lithium chloride solution, 8 M, for molecular biology, ≥99% (L7026).
[3] MedChemExpress. Lithium chloride, for molecular biology, 99% (HY-Y0649D).
[4] 广州美基生物科技有限公司. 8M LiCl产品说明.
[5] 氯化锂溶解度数据. 20°C下水溶性为832 g/L.
[6] Sambrook J, Russell DW. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 3rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001.
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