技术文章
Technical articleDNA乙醇沉淀加完盐却不见絮状物、蛋白盐析怎么都析不出来、细胞一放进溶液就皱缩或破裂——这些分子生物学和细胞实验中让人反复纠结的问题，排查到最后往往发现：氯化钠的浓度从一开始就没搞对。
氯化钠溶液（生理盐水/高盐溶液）是生物医药和分子生物学实验室最基础的盐溶液之一——核酸提取、蛋白纯化、细胞培养、免疫检测，处处都有它的身影。浓度差一点，实验结果就偏十万八千里。
本文将系统梳理氯化钠溶液的不同用途对应的浓度选择、配制方法、灭菌要点及保存注意事项。
| 用途 | 浓度 | 配制方法（1 L） | 说明 |
|---|---|---|---|
| 哺乳动物生理盐水 | 0.9%（w/v） | 称取9.0 g NaCl，定容至1 L | 经典生理盐水，与哺乳动物体液等渗 |
| 鸟类生理盐水 | 0.75%（w/v） | 称取7.5 g NaCl，定容至1 L | NaCl主成分浓度，完整配方还含其他盐类 |
| 两栖类生理盐水 | 0.65%（w/v） | 称取6.5 g NaCl，定容至1 L | NaCl主成分浓度，完整配方还含其他盐类 |
| 用途 | 浓度 | 配制方法（1 L） | 说明 |
|---|---|---|---|
| DNA高盐沉淀 | 2 mol/L（约11.7%） | 称取116.9 g NaCl，定容至1 L | 常用浓度，用于DNA选择性沉淀 |
| 蛋白盐析/饱和溶液 | 饱和溶液（25℃约26.5%，即36.0 g/100 mL水） | 过量NaCl溶于水至不再溶解，取上清液过滤使用 | 饱和浓度随温度变化 |
| 步骤 | 操作 | 关键说明 |
|---|---|---|
| ① 计算 | 0.9% × 1000 mL = 9.0 g NaCl | 生理盐水指质量体积比（w/v），即0.9 g/100 mL——不要与摩尔浓度（mol/L）混淆 |
| ② 称量 | 用分析天平称取9.0 g NaCl（精确至0.1 g） | 高浓度溶液（如2 mol/L）建议用分析天平，误差≤±0.1g |
| ③ 溶解 | 将NaCl加入约800 mL去离子水中，搅拌至完全溶解 | 2 mol/L及以下室温即可完全溶解；饱和溶液可适当加热（≤50℃）促进溶解 |
| ④ 检查 | 定容前确认烧杯底部无未溶解颗粒 | 如有不溶物，需继续搅拌 |
| ⑤ 定容 | 加去离子水定容至1 L，充分混匀 | — |
| ⑥ 灭菌与保存 | 如需无菌：121℃高压蒸汽灭菌15~20分钟 | NaCl溶液耐热，可高压灭菌；灭菌后冷却至室温，用无菌去离子水补足至原体积——否则水分蒸发导致浓度偏高 |
| ⑦ 保存 | 常温密闭保存 | 避免水分蒸发导致浓度升高；保质期可达12个月以上；建议小量分装，避免反复开瓶污染 |
| 控制点 | 要求/措施 | 原因 |
|---|---|---|
| 浓度单位区分 | 生理盐水指质量体积比（w/v） ，0.9 g/100 mL | 不要与摩尔浓度（mol/L）混淆 |
| 动物种属差异 | 哺乳类0.9% / 鸟类0.75% / 两栖类0.65% | 用错会导致细胞溶血或皱缩；鸟类/两栖类完整配方还需添加其他盐类 |
| 灭菌后补液 | 灭菌后冷却至室温，补足至原体积 | 高压灭菌时水分蒸发，不补足会导致浓度偏高 |
| 饱和溶液温度 | 室温（25℃）饱和浓度约36.0 g/100 mL水 | 4℃会有晶体析出，使用前需恢复至室温并充分摇匀或过滤 |
| pH检查 | 纯NaCl溶液pH约6.7~7.3 | 如有偏离可用稀HCl/NaOH微调——但NaCl本身无缓冲能力，调节后pH可能因CO₂吸收再次漂移；如需稳定pH，建议改用PBS等缓冲体系 |
| 异常现象 | 原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| DNA加盐后沉淀不出来 | NaCl浓度不足或未混匀 | 确认终浓度达2 mol/L；充分混匀后离心 |
| 蛋白盐析无沉淀 | 溶液未达饱和或温度过低 | 确认饱和状态；恢复至室温后使用 |
| 细胞在溶液中皱缩或破裂 | 盐浓度与细胞类型不匹配 | 确认所用浓度对应的物种（0.9%哺乳/0.75%鸟类/0.65%两栖类） |
| 灭菌后使用时感觉“偏咸” | 灭菌后未补足蒸发水分 | 灭菌后冷却至室温，补足至原体积 |
| 饱和溶液出现大量晶体 | 温度降低导致溶解度下降 | 恢复至室温并充分摇匀，取上清液使用 |
自己配制氯化钠溶液虽然原理简单，但不同物种的等渗浓度差异、灭菌后补液、饱和溶液温度控制——每一步都可能影响实验结果。
杭州富沃克生物科技有限公司推出的氯化钠溶液系列，采用高纯NaCl与超纯水在洁净环境精准配制，浓度准确、即开即用。覆盖0.9%生理盐水、2 mol/L高盐溶液、饱和溶液等多种规格，适配核酸提取、蛋白盐析、细胞培养等多种实验场景。省去自行配制的繁琐与浓度不准的风险。
邮箱：support@fwkbio.com
厂家联系微信号：19850855600
官网链接：氯化钠溶液-杭州富沃克生物科技有限公司
参考文献
[1] 苏州市教育科学研究院. 实验活动5 一定溶质质量分数的氯化钠溶液的配制
[2] 常用药品试剂和培养基的配制——生理盐水. 丁香通
[3] 2M氯化钠溶液产品说明. 杭州富沃克生物
[4] 氯化钠滴定溶液标准物质. 普天同创
[5] 饱和NaCl溶液产品说明. 杭州富沃克生物
[6] 傅献彩等. 《物理化学》（第五版）. 高等教育出版社
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