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Technical article采血针刚拔出，注射器里的血液就开始出现细小的凝丝；加入抗凝剂后提取基因组DNA，得率却低得可怜——这些血液实验中反复出现的状况，排查到最后往往发现：抗凝液本身没用对。
柠檬酸葡萄糖溶液B（ACD-B）是血液保存中最经典的“抗凝守护者”——通过螯合钙离子阻止凝血、为红细胞提供能量、保护血细胞完整性，从而为后续DNA提取等实验提供高质量样本。本文将系统梳理ACD-B的核心配方、ACD-A与ACD-B的区别、使用方法及关键注意事项。
ACD-B，全称Acid-Citrate-Dextrose Solution B，由柠檬酸、柠檬酸钠和葡萄糖按特定比例配制的无菌抗凝溶液，1943年研发至今仍是全血和红细胞液态保存的经典方案。
三重核心功能：
| 组分 | 浓度（w/v） | 配制用量（1 L） | 核心作用 |
|---|---|---|---|
| 柠檬酸（C₆H₈O₇·H₂O） | 0.48% | 4.8 g | 维持微酸性（pH约5.0），防止葡萄糖高温灭菌时焦化 |
| 柠檬酸钠（Na₃C₆H₅O₇·2H₂O） | 1.32% | 13.2 g | 螯合Ca²⁺，阻断凝血级联反应 |
| 葡萄糖（C₆H₁₂O₆·H₂O） | 1.47% | 14.7 g | 为红细胞代谢提供能量，延长保存时间 |
| 注射用水 | — | 定容至1 L | 溶剂 |
| 对比项 | ACD-A | ACD-B |
|---|---|---|
| 配方浓度 | 较高（柠檬酸8.0g/L、柠檬酸钠22g/L、葡萄糖24.5g/L） | 约为A的一半（柠檬酸4.8g/L、柠檬酸钠13.2g/L、葡萄糖14.7g/L） |
| 用量比例 | 每100 mL血液加15 mL | 每100 mL血液加25 mL |
| 适用场景 | 常规采血和血液保存 | 需要更温和抗凝条件的实验 |
| 4℃保存期 | 21天 | 21天 |
每6 mL新鲜血液加入1 mL ACD-B溶液（即血液:抗凝液 = 6:1），轻轻颠倒混匀。
| 步骤 | 操作 | 关键说明 |
|---|---|---|
| ① 采血前准备 | 将ACD-B溶液恢复至室温，取适量置于无菌离心管中 | — |
| ② 采血 | 按6:1比例采集新鲜血液（如6 mL血 + 1 mL ACD-B） | 确保比例准确 |
| ③ 混匀 | 立即轻轻颠倒混匀5-8次 | 避免剧烈振荡（防止溶血） |
| ④ 保存 | 2-6℃保存，可保存21天 | — |
| ⑤ DNA提取 | 取抗凝血直接用于基因组DNA提取实验 | — |
| 控制点 | 要求/措施 | 原因 |
|---|---|---|
| 无菌操作 | 全程无菌操作，使用0.22μm过滤除菌或121℃高压灭菌15分钟 | ACD-B为无菌溶液，污染会导致抗凝失败或样本变质 |
| 保存条件 | 4℃密封保存，有效期一年 | 未开封可保存一年；分装使用可避免反复开启污染 |
| 抗凝比例 | 血液:ACD-B = 6:1（V:V） | 确保有效螯合Ca²⁺，抗凝效果最佳 |
| 混匀方式 | 立即轻轻颠倒混匀5-8次 | 剧烈振荡会导致红细胞破裂（溶血） |
| 实验用途 | 仅供科研使用 | 不得用于临床诊断或治疗 |
| 安全操作 | 穿实验服、戴一次性手套 | — |
| 异常现象 | 原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| 采血后仍凝固 | 抗凝比例不当或未及时混匀 | 确认6:1比例；采血后立即轻柔颠倒混匀 |
| 提取的DNA得率低 | 血液保存时间过长或反复冻融 | 使用新鲜血液（建议采血后尽快提取）；避免冻融 |
| 离心后血浆层呈红色 | 混匀时剧烈振荡导致溶血 | 采血后轻缓颠倒混匀；避免剧烈摇动 |
| 抗凝液开封后保存不当失效 | 未密封或未4℃保存 | 分装后密封，4℃保存，避免反复开盖 |
自行配制ACD-B涉及柠檬酸、柠檬酸钠的精确称量、pH控制、无菌过滤——每个环节的疏忽都可能影响抗凝效果和后续实验质量。
杭州富沃克生物科技有限公司推出的柠檬酸葡萄糖溶液B（ACD，无菌），采用0.48%柠檬酸、1.32%柠檬酸钠、1.47%葡萄糖科学配比，以超纯水精准配制，0.22μm过滤除菌，无DNase/RNase污染。每6mL新鲜血液加1mL混匀即可，4℃密封保存有效期一年。适用于新鲜血液抗凝处理、基因组DNA提取、血细胞保存等科研实验。省去自行配制的繁琐与批次波动风险。
| 产品名称 | 规格 | 产品货号 |
|---|---|---|
| 柠檬酸葡萄糖溶液B | 50mL / 100mL / 250mL / 500mL / 1000mL | NMS606-01—NMS606-05 |
邮箱：support@fwkbio.com
厂家联系微信号：19850855600
参考文献
[1] 柠檬酸葡萄糖溶液B (ACD, 无菌)（ST496-100ml）产品说明书[EB/OL]. 碧云天生物技术.
[2] ACD保存液[EB/OL]. 百度百科.
[3] 柠檬酸葡萄糖溶液B 强效抗凝缓冲液[EB/OL]. 杭州富沃克生物科技有限公司.
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