TE缓冲液配制与使用全攻略｜Tris-EDTA体系保护DNA/RNA免受降解

发布日期： 2026-07-19

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DNA提完随手用ddH₂O一溶，第二天跑胶条带模糊、降解甚至消失——这种“辛辛苦苦大半天，一夜回到解放前”的场面，相信不少人都经历过。

问题出在哪里？纯水缺乏pH缓冲和金属离子螯合保护，且难以保证绝对无核酸酶污染。样品在纯水里没有保护，正在慢慢受损。有没有一种简单、稳定、安全的保存方案？

TE缓冲液就是答案。本文将系统梳理TE缓冲液的核心保护原理、标准配方、母液与工作液的配制方法及关键注意事项。

TE缓冲液（Tris-EDTA buffer）是分子生物学中最基础的核酸保存试剂。“TE”这个名字来源于它的两大核心组分：Tris（pH缓冲剂）和EDTA（金属离子螯合剂）。

它的核心作用就一句话：溶解DNA/RNA，同时保护其不被降解。

两大组分各司其职：

标准1×TE缓冲液的组成为：10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0。

配制TE缓冲液之前，需要先准备好两种母液。以下是100 mL体系的配制方案：

步骤	操作	关键说明
① 称量	称取12.12 g Tris碱	—
② 溶解	溶于约80 mL纯化水中	—
③ 调pH	冷却至室温，用浓HCl（约12M）逐滴加入，边加边搅拌，用pH计监测至pH 8.0	必须在通风橱中操作
④ 定容	加纯化水定容至100 mL	—

步骤	操作	关键说明
① 称量	称取18.61 g EDTA-Na₂·2H₂O	—
② 溶解	溶于约80 mL纯化水中	EDTA二钠盐在pH接近8.0时才完全溶解
③ 调pH	用10M NaOH溶液逐滴加入，边加边剧烈搅拌，直至pH达到8.0（溶液澄清透明）	这是EDTA完全溶解的关键
④ 定容	加纯化水定容至100 mL	—

⚠️ 核心警示：EDTA在pH 8.0以下无法完全溶解。调pH这一步不能省——否则EDTA粉末一直悬在那里就是不化。Tris-HCl和EDTA的母液都必须是pH 8.0，否则混合后终浓度pH会偏离目标。

有了两种母液，配制工作液就非常简单了：

步骤	操作	关键说明
① 量取Tris	量取10 mL 1 M Tris-HCl（pH 8.0），加入约800 mL纯化水中	—
② 量取EDTA	量取2 mL 0.5 M EDTA（pH 8.0），加入上述溶液中	—
③ 定容	充分混匀后用纯化水定容至1 L	—
④ 灭菌（推荐）	121℃高压灭菌15~20分钟	彻底灭活核酸酶
⑤ pH复校	灭菌后冷却至室温，用pH计重新校核pH，如有偏离可调回8.0	高压灭菌可能导致pH轻微漂移
⑥ 分装保存	分装后室温或4℃保存	建议分出工作分装液，避免反复从储存瓶中取用

小量配制参考：如需配制100 mL，只需取1 mL 1M Tris-HCl（pH 8.0）和0.2 mL 0.5M EDTA（pH 8.0），加纯化水定容至100 mL即可。

控制点	要求/措施	原因
EDTA溶解	pH必须调到8.0才会完全溶解	EDTA二钠盐在中性pH下溶解度极低
母液pH	Tris-HCl和EDTA母液都必须是pH 8.0	否则混合后终浓度pH会偏离目标
灭菌方式	推荐121℃高压灭菌15~20分钟	彻底灭活核酸酶；灭菌后需重新校准pH
短期保存	DNA可4℃保存	—
长期保存	建议-20℃或-80℃	避免反复冻融，冰晶会物理损伤DNA
酶反应兼容性	TE中的EDTA会螯合Mg²⁺	直接用于酶切/PCR前需注意——可能需要稀释或透析去除EDTA

主图2.jpg

自行配制TE缓冲液需要先配两种母液（Tris-HCl调pH、EDTA调pH至8.0才能溶解），再混合定容、高压灭菌、复测pH——步骤虽不复杂，但每一步都可能影响最终质量。

杭州富沃克生物科技有限公司推出的TE缓冲液，采用高纯原料精准配制，10 mM Tris-HCl、1 mM EDTA、pH 8.0标准配方，无菌处理，即开即用。适用于DNA/RNA溶解与保存、核酸稀释等多种分子生物学实验场景。省去母液配制、pH校准、高压灭菌的繁琐流程。

产品名称	规格	产品货号
TE缓冲液	10 mL / 100 mL	TEH606-01

参考文献

[1] Sambrook J, Russell DW. Molecular Cloning: A Laboratory Manual[M]. 3rd ed. Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001.
[2] TE缓冲液[EB/OL]. 维基百科, (2013-09-25). https://zh.wikipedia.org/zh-sg/TE缓冲液
[3] TE缓冲液配制及作用[EB/OL]. Thermo Fisher Scientific. https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/rna-extraction/te-buffer.html
[4] TE缓冲液[EB/OL]. 百度百科, (2026-02-07). https://baike.baidu.com/item/TE缓冲液/5846711