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Technical article做Western Blot的同学都懂——好不容易跑出来的胶，条带挤成一团、大分子蛋白死活分不开、电泳跑完一看跟没跑一样……你换了电压、调了时间、重新配了胶，最后发现是电泳缓冲液压根没用对。
Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液是专门为分离中等到大分子量蛋白而设计的变性电泳缓冲液，尤其适用于Bis-Tris体系预制胶（如Thermo Fisher的NuPAGE系统），以条带清晰、分辨率高、电泳速度快著称[1][2]。今天一篇讲清楚它是什么、怎么配、怎么用。
Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液是一种专门用于Bis-Tris体系蛋白凝胶电泳的变性电泳缓冲液[3][4]。它由Tris（维持pH）、MOPS（提供缓冲能力）、SDS（给蛋白披上负电荷“外套”）三大核心成分组成[1][5]。
它跟传统的Tris-甘氨酸电泳缓冲液有什么区别？
对比项 | Tris-MOPS-SDS | Tris-甘氨酸-SDS |
适用凝胶体系 | Bis-Tris凝胶体系（如NuPAGE系统）[1][3] | Tris-甘氨酸凝胶体系 |
优势蛋白范围 | 中到大分子量蛋白（>30 kDa）[1][3] | 常规蛋白（10-300 kDa） |
电泳速度 | 较快（可恒定200V）[2] | 常规速度 |
大分子分辨率 | 更佳（MOPS缓冲离子迁移率低，条带更窄）[3][4] | 常规分辨率 |
能否混用 | 不能与Tris-甘氨酸体系混用[1][3] | — |
缓冲液循环 | 不需要（即无需内外槽液循环）[2] | 一般需要 |
一句话总结：你的预制胶是Bis-Tris体系的（如NuPAGE），想分离大分子蛋白，选MOPS就对了[1][3]。
根据多家供应商和标准配方，1× Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液的标准组成如下[1][2][5]：
成分 | 1×浓度 | 核心作用 |
Tris Base | 50 mM | 维持缓冲液pH稳定[1] |
MOPS | 50 mM | 提供主要的缓冲能力（Good's缓冲剂）[1][3] |
SDS | 0.1%（w/v） | 使蛋白变性并带上负电荷[2][5] |
EDTA | 1 mM | 螯合二价金属离子（如Mg²⁺、Ca²⁺、Zn²⁺），抑制金属蛋白酶活性[1][5] |
pH：25℃时约为 7.3[1][2]（不同品牌间可能存在±0.2的偏差，使用前请以产品说明书为准）
如果你有Tris、MOPS、SDS和EDTA单组分试剂，可以自己配[1][5]：
组分 | 称量 |
Tris Base | 6.06 g |
MOPS | 10.46 g |
SDS | 1.0 g |
EDTA | 0.3 g |
1. 称取上述试剂，加入约800 mL去离子水[5]
2. 搅拌至完全溶解（SDS需要一点耐心，应缓慢加入避免结块）[1]
3. 用去离子水定容至1 L（最终体积为1 L，非加入1 L水）[5]
4. 检查pH，应在7.3左右（一般无需调节）[2]
⚠️ 安全提醒：称量SDS粉末时建议佩戴口罩，避免吸入粉尘。SDS对皮肤有刺激性，建议佩戴手套[5]。
如果不想每次都从头配，可以先配20×浓缩液，使用时稀释20倍[1][6]。
20×母液配方（1 L）[6][7]：
组分 | 称量 |
Tris Base | 121.2 g |
MOPS | 209.2 g |
SDS | 20 g |
EDTA | 6 g |
配制时SDS溶解较慢，可适当加热助溶（≤50℃）[6]。定容至1 L后，使用时取50 mL母液（取液前应充分摇匀），加去离子水定容至1 L，混匀后使用[6][7]。
⚠️ 注意：如需无菌使用，应用0.22 μm滤膜过滤除菌，不可高温高压灭菌（SDS在高温下会分解或起泡）[1][3]。
不想称量、不想调pH、不想担心批间差？直接买速溶颗粒——每袋可配制1 L 1×工作液，室温保存长达3年[4]。
使用方法[4][7]：
1. 烧杯中加入约600 mL去离子水，放一个磁力搅拌子
2. 将1袋速溶颗粒的全部内容物缓慢倒入烧杯中
3. 搅拌至完全溶解
4. 加去离子水定容至1 L
即得1× Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液
要点 | 说明 |
适用体系 | 仅适用于Bis-Tris体系预制胶（如Thermo Fisher NuPAGE系统），不能用于Tris-甘氨酸体系[1][3] |
电泳条件 | 标准迷你胶建议200V恒压，以溴酚蓝指示剂位置为准停止电泳（一般30-40分钟完成）[2][6] |
重复使用 | 不建议重复使用——用过的缓冲液离子强度改变，影响条带质量[5] |
低温结晶 | 低温下SDS可能析出结晶，水浴加热至40-50℃助溶，轻轻摇晃至完全溶解，避免超过60℃[1][6] |
缓冲液循环 | Bis-Tris体系电泳不需要内外槽液循环，按常规方式加样即可[2] |
保存条件 | 4℃避光保存，一般12个月有效期[1][7]；速溶颗粒可室温保存长达3年[4] |
MOPS与MES的选择 | MOPS适合中到大分子蛋白（>30 kDa）[1][3]；MES适合小分子蛋白（<30 kDa）[1][3]。具体选择还需结合凝胶浓度和分辨率要求，建议参考预制胶供应商推荐 |
自己配MOPS缓冲液虽然可行，但Tris、MOPS、SDS、EDTA四种试剂称量起来相当繁琐，SDS粉末飞扬还容易引起皮肤过敏[1][5]。而且每次配出来的pH、离子强度都可能不一样，直接影响实验重复性[4]。
如果追求省心省力、批次稳定，可以直接选择杭州富沃克生物科技有限公司的即用型Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液系列[7]：
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邮箱：support@fwkbio.com
官网：www.fwkbio.com
官网链接：Tris-MOPS-SDS Running Buffer 10X Bis-Tris 胶蛋白电泳缓冲液 仅限科研使用-富沃克生物科技（深圳）有限公司
参考文献
[1] MOPS缓冲液速溶颗粒产品说明[EB/OL]. 生物在线.
[2] Tris-MOPS SDS-PAGE电泳缓冲液产品说明[EB/OL]. 江苏先丰纳米材料科技有限公司.
[3] Tris-MOPS-SDS缓冲液[EB/OL]. 生物谷（BioMart）, 2023-10-24.
[4] Tris-MOPS-SDS速溶颗粒产品说明[EB/OL]. LABLEAD, 2026-01-26.
[5] Tris-MOPS-SDS缓冲液产品说明[EB/OL]. 中科百抗.
[6] MOPS/ SDS Running Buffer [20X]产品说明[EB/OL]. G-Biosciences.
[7] Tris/MOPS/SDS Running Buffer (20×)产品说明[EB/OL]. 阿拉丁（Aladdin）.
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