RIPA强裂解液

RIPA裂解液（Radio Immunoprecipitation Assay Lysis Buffer）是一种传统的细胞组织快速裂解液，其名称来源于放射免疫沉淀实验。根据裂解强度，RIPA裂解液通常分为强、中、弱三类，其中RIPA强裂解液因含有较高浓度的去垢剂成分，裂解能力最强，是总蛋白提取实验中的首选工具。

RIPA强裂解液的核心成分包括50mM Tris（pH 7.4）、150mM NaCl、1% Triton X-100、1%脱氧胆酸钠和0.1% SDS，并添加了钒酸钠、氟化钠、EDTA、亮肽素等多种蛋白酶和磷酸酶抑制剂，可有效抑制蛋白降解。0.1% SDS和1%脱氧胆酸钠的协同作用，使其能够有效破坏细胞膜和核膜结构，提取核蛋白和膜蛋白的效率显著优于中、弱型裂解液。该产品适用于动物细胞和组织样品的总蛋白提取，裂解获得的蛋白样品可用于Western Blot、免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP）和ELISA等下游实验。

选择RIPA裂解液型号时，核心依据是目标蛋白的定位和性质。若目标蛋白位于细胞核或与细胞膜紧密结合，或需最大程度提取难溶性蛋白，建议选用强型。若需保持蛋白天然相互作用（如Co-IP实验），则需权衡裂解强度对蛋白复合物的破坏作用——裂解力越强，蛋白复合物被拆解的概率越高，可能影响Co-IP结果。对于常规细胞质蛋白提取，中、弱型裂解液通常已足够，可避免过度裂解带来的背景干扰。

使用RIPA强裂解液时需注意以下关键操作：裂解前需将裂解液和细胞样品预冷至4℃，所有操作在冰上进行；使用前需加入PMSF至终浓度1mM（通常随产品附赠），PMSF需现配现用，不可一次性全部加入裂解液中长期存放；可根据实验需求额外添加蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。贴壁细胞按6孔板每孔150-250μL、悬浮细胞按50-100万细胞/100μL的比例加入裂解液；组织样品按20mg组织加入150-250μL的比例处理。裂解后需4℃、10000-14000g离心3-5分钟取上清。裂解产物中出现的一小团透明胶状物为基因组DNA-蛋白质复合物，属正常现象，若目标蛋白不与DNA紧密结合，离心取上清即可；若需检测与基因组紧密结合的核蛋白，建议超声处理（功率100-200W，每次3-5秒，间隔10秒，共3-5次）后离心取上清。该产品含高浓度去垢剂，蛋白浓度测定推荐使用BCA法，Bradford法（考马斯亮蓝法）会受去垢剂干扰导致结果偏高。

杭州富沃克生物科技有限公司提供RIPA强裂解液产品，采用经典配方，有效裂解细胞膜与核膜，提取膜蛋白与核蛋白效率高，适用于Western Blot、IP等蛋白分析实验场景。

厂家联系微信号（同手机号）：19850855600

或扫二维码添加微信，可免费领取试用装（包邮）：