核糖核酸酶A RNase A CAS9001-99-4 质粒提取RNA去除 富沃克生物

核糖核酸酶A（RNase A）——高效降解RNA，核酸纯化的理想之选

产品概述

核糖核酸酶A（Ribonuclease A，简称RNase A）是一种来源于牛胰腺的高度专一性核酸内切酶，分子量约为13.7 kDa。作为一种含4个二硫键的单链多肽，RNase A能够特异性降解单链RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）残基。其作用机制是切割核苷酸5′-核糖与相邻嘧啶核苷3′-核糖上磷酸基团之间的磷酸二酯键，产生的2′,3′-环磷酸可进一步水解为相应的3′-核苷磷酸盐。

RNase A在分子生物学领域发挥着关键作用，其特异性降解RNA的能力使其成为核酸纯化与实验精准性保障的核心工具。本品为即用型溶液，经严格纯化处理，不含DNase和蛋白酶，使用前无需热处理。产品以溶液形式提供，浓度为10 mg/mL，保存于50 mM Tris-HCl（pH 7.4）和50%（v/v）甘油缓冲液中，适配各类核酸提取与分子生物学实验。

核心优势

一、高效特异性降解RNA，对DNA无影响

RNase A是一种核糖核酸内切酶，能够特异性识别并切割单链RNA上的嘧啶核苷酸位点。在低盐浓度（0-100 mM NaCl）下，可切割单链RNA、双链RNA以及RNA/DNA杂合子中的RNA链；当NaCl浓度≥300 mM时，则特异性切割单链RNA。该酶不会水解DNA，因DNA缺少形成环形中间体必需的2′-OH。这一特性使其能够在不损伤DNA完整性的前提下，高效去除样本中的RNA污染，是核酸纯化中不可或缺的工具酶。

二、无DNase和蛋白酶污染，保障实验精准

本产品经严格纯化工艺处理，不含DNase和蛋白酶活性，使用前无需热处理。相关检测表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、蛋白酶污染。高纯净度有效避免外源酶对DNA和蛋白样本的降解，保障核酸纯化与蛋白分析的精准性。

三、稳定性极佳，耐受性强

RNase A是一种极其稳定的酶，对加热具有显著的耐受性。在15-75℃范围内均有酶活，最适温度为60℃；有活性的pH范围为6-10，最适pH为7.6。经大多数变性剂处理后仍能轻松复性。这一特性使其在各类实验条件下均能保持稳定活性，操作容错率高。

四、即用型溶液，操作便捷

本品为即用型溶液，浓度为10 mg/mL，无需称量、溶解或预处理，开盖即可直接使用。保存于50 mM Tris-HCl（pH 7.4）和50%（v/v）甘油缓冲液中，可在-20℃长期稳定保存。即用型设计大幅简化了实验操作流程，有效避免配制过程中的污染风险与浓度误差。

核心应用场景

一、质粒DNA与基因组DNA制备中去除RNA（核心应用）

RNase A最常见的应用在于质粒DNA或基因组DNA制备过程中去除RNA。在质粒提取中，RNase A的推荐终浓度为100 μg/mL，即按照1/100体积加入10 mg/mL RNase A溶液，37℃孵育10分钟即可高效降解RNA。也可将RNase A溶液按照每mL溶液I加入约20μL的比例，充分悬浮菌体后直接进行质粒提取。去除RNA污染后，可显著提升DNA纯度，保障后续PCR、酶切、测序等实验的准确性。

二、重组蛋白纯化中去除RNA污染

在重组蛋白提取与纯化过程中，RNA常与蛋白共纯化，影响蛋白纯度与下游功能研究。本产品可有效去除重组蛋白抽提物中的RNA，获得高纯度蛋白样品，适用于蛋白结晶、功能分析等对纯度要求较高的实验。

三、核糖核酸酶保护分析（RPA）与RNA序列分析

RNase A可特异性降解未与探针杂交的单链RNA区域，是核糖核酸酶保护分析（Ribonuclease Protection Assay） 的核心工具酶。还可用于RNA序列分析以及DNA或RNA单碱基突变图谱绘制等分子生物学实验。

四、RNA干扰与核酸杂交实验

在RNA干扰（RNAi）实验中，RNase A可用于验证RNA双链的形成与稳定性。在核酸杂交实验中，可用于去除RNA:DNA杂交体中未杂交的RNA区域，提高杂交信号的特异性。

产品参数

品质保障

• 经严格纯化工艺处理，不含DNase和蛋白酶

• 使用前无需热处理

• 功能检测方法为质粒DNA提取过程中的RNA降解验证

• 批次间活性稳定，每批次经严格质检

• 仅限科研使用，严禁用于临床诊断或治疗

使用与储存建议

一、储存条件

建议-20℃密封保存，有效期1-2年。避免反复冻融，建议分装后使用。

二、使用方法

1. 质粒DNA/基因组DNA制备：按1/100体积加入10 mg/mL RNase A溶液（终浓度100 μg/mL），37℃孵育10分钟。

2. 蛋白纯化中去除RNA：根据样品体积按推荐工作浓度（1-100 μg/mL）直接添加。

3. 稀释方法：如需稀释，请用无菌去离子水（超纯水）或无菌无酶水。

三、注意事项

• RNase A会吸附到玻璃表面，操作中应尽量避免使用玻璃器皿，建议将配制好的溶液装入塑料离心管中保存。

• 抑制剂：最有效的抑制剂是来自哺乳动物细胞胞质中的~50 kDa蛋白（如RiboLock™ RNase抑制剂）。其他抑制剂包括：2′,3′-环磷酸钒酸盐、SDS、焦碳酸二乙酯（DEPC）、4M异硫氰酸胍+0.1M β-巯基乙醇及重金属离子。

• 失活方法：可通过酚/氯仿抽提使酶失活。

• 安全提示：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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