0.5M EDTA配制全攻略(1L):称取186.1g Na2EDTA·2H2O溶于800mL去离子水,用NaOH调节pH至8.0(约需20g)使EDTA完全溶解,定容至1L,分装后高压灭菌,室温保存。核心原理:EDTA在pH<7.0时几乎不溶,只有pH达到8.0才能完全解离溶解。如4℃出现结晶,37℃水浴复···
2.5N HCl配制全攻略(100mL):取78.4mL去离子水,缓慢加入21.6mL浓盐酸(11.6N),边加边搅拌,混匀后室温保存。关键提醒:浓盐酸具强腐蚀性和挥发性,必须在通风橱中操作,严格遵守“酸入水”规则,佩戴防护眼镜和防腐蚀手套。实验室基础试剂配制必读。
苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)配制全攻略:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积氯仿/异戊醇(24:1)混合均匀,棕色玻璃瓶4℃保存。氯仿使蛋白变性并促进分相,异戊醇消除气泡。关键提醒:溶液有剧毒,严禁在通风橱外操作,皮肤接触用大量水冲洗,忌用乙醇。核酸提取蛋白···
Tris-HCl平衡苯酚配制全攻略:-20℃结晶苯酚68℃融解,加0.1%羟基喹啉,依次用1M和0.1M Tris-HCl(pH8.0)平衡,磁力搅拌15分钟×2次,弃水相,最终有机相pH≥7.8。棕色瓶4℃避光保存。关键提醒:苯酚腐蚀性极强,必须在通风橱中操作,戴手套和防护镜。核酸提···
10%(W/V)SDS溶液配制全攻略(100mL):称取10g高纯度SDS,68℃水浴加热溶解于80mL去离子水中,滴加浓盐酸调pH至7.2,定容至100mL,室温保存。关键提醒:SDS对呼吸道和皮肤有强烈刺激性,称量时务必佩戴口罩、护目镜和手套,并在通风橱中操作。实验室基础试剂···
2N NaOH配制全攻略(100mL):称取8g NaOH,缓慢加入80mL去离子水中(边加边搅拌),完全溶解并冷却至室温后定容至100mL,转移至塑料容器中室温保存。关键提醒:必须使用塑料烧杯(玻璃有炸裂风险),定容前务必冷却至室温(高温体积膨胀会导致浓度偏差)。实···
Solution III中和液配方全解析:3M乙酸钾(KOAc)+ 5M冰醋酸(CH₃COOH)配制方案(500mL),配制步骤及关键操作提醒——使用前4℃预冷促进蛋白-SDS复合物(PDS)完全沉淀;加入后温和颠倒混匀6-8次,中和不均匀会导致质粒DNA被包裹损失。质粒提取中和步骤核心···
Solution II碱裂解液配方全解析:200mM NaOH + 1% SDS配制方案(500mL),10% SDS与2N NaOH母液准备步骤、配制方法及关键保存提醒——空气中CO₂会迅速消耗NaOH导致pH下降,必须现配现用或3天内用完。SDS易起泡,严禁剧烈搅拌。质粒提取裂解步骤核心试剂,附即···
Solution I质粒提取重悬液配方全解析:25mM Tris-HCl、10mM EDTA、50mM Glucose配制方案(1L),高压灭菌条件、4℃保存要点及RNase A添加方法(每50mL加2mL 20mg/mL)。重悬必须充分无菌块,否则质粒产量大幅下降。质粒提取第一步核心试剂,附即用型产品推荐。···
如果你是第一次听说“LB肉汤”,可能会以为是一道菜。但在生物实验室里,它是培养细菌最常用的“营养快餐”——就像我们人类离不开米饭,大肠杆菌也离不开LB肉汤。LB到底是什么?LB的全名是Luria-Bertani肉汤,由Giuseppe Bertani于1951年发明[1]。由于LB与“···