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汇总常用大肠杆菌K-12株来源菌株基因型(含DH5α、JM109、XL1-Blue、BL21(DE3)等40余种),详列各菌株基因型及关键突变(recA、endA、hsdR等),为分子克隆菌株选择提供快速参考。
提供溴酚蓝和二甲苯青FF在非变性及变性聚丙烯酰胺凝胶(3.5%-20%)中对应的DNA片段迁移参照表,用于电泳过程中实时估算核酸片段大小,快速判断最佳终止时间。
提供离心机转速(rpm)与相对离心力(RCF)完整换算手册,含公式计算法及列线图快速法。明确转子半径单位(mm/cm)对应常数,强调安全限值与实验记录规范,确保离心条件精准可控、结果可重复。
提供SDS-PAGE浓缩胶(5%)及分离胶(6%/8%/10%/12%/15%)完整配方表,涵盖1-50ml多体积规格。含30% Acrylamide、Tris-HCl、SDS、APS、TEMED组分。按蛋白分子量选择分离胶浓度,APS需现配现用,丙烯酰胺具神经毒性需全程防护。
提供PAGE凝胶(核酸电泳用)配制方案,基于30% Acrylamide(29:1)、5×TBE、10% APS、TEMED,涵盖3.5%/5%/8%/12%/20%五种浓度。小片段选12%-20%,大片段选3.5%-5%。丙烯酰胺具神经毒性,需全程防护,APS需现配现用。
提供5种抗生素贮存液通用配制方案:氨苄/羧苄(50mg/ml水溶)、氯霉素(34mg/ml乙醇)、卡那/链霉素(10mg/ml水溶)、四环素(5mg/ml乙醇)。水溶液需0.22μm过滤除菌,乙醇溶液无需除菌,分装后-20℃避光保存。四环素筛选需避免培养基含镁盐。
提供1L TB/Amp/X-Gal/IPTG高密度蓝白斑筛选平板完整配制方案:TB培养基加15g Agar,磷酸盐缓冲液单独灭菌,冷却至60℃加入Ampicillin、IPTG、X-Gal后铺板。营养高于LB平板,适用于高密度蛋白表达的蓝白斑克隆筛选,4℃避光保存。
提供1L LB/Amp/X-Gal/IPTG蓝白斑筛选平板完整配制方案:10g Tryptone、5g Yeast Extract、10g NaCl、15g Agar,调pH7.0后高压灭菌,冷却至60℃加入1ml Ampicillin(100mg/ml)、1ml IPTG(24mg/ml)、2ml X-Gal(20mg/ml),铺制平板后4℃避光保存,适用于蓝白···
提供固体培养基通用配制方案:液体培养基中加入15g/L琼脂(铺板)或7g/L琼脂糖(顶层琼脂),高压灭菌后冷却至50-60℃加入热不稳定物质(如抗生素),混匀后铺制平板(30-35ml/90mm皿)。琼脂/琼脂糖易吸潮需精准称量。
NZM培养基 2026-07-15
提供1L NZM基础噬菌体培养基完整配制方案:10g NZ胺、5g NaCl、2g MgSO4·7H2O,调pH7.0后高压灭菌。与NZYM相比不含酵母提取物,营养成分更基础,适用于λ噬菌体培养及特定筛选实验,4℃保存。