提供50ml 20mg/ml X-Gal溶液完整配制方案:1g X-Gal溶于DMF定容至50ml,小份分装后-20℃避光保存。适用于蓝白斑筛选实验,X-Gal对光敏感须全程避光,DMF具刺激性须在通风橱内操作。
提供50ml 24mg/ml IPTG溶液完整配制方案:1.2g IPTG灭菌水定容至50ml,0.22μm过滤除菌后小份分装-20℃保存。适用于原核蛋白表达系统的lac operon诱导,无菌操作,避免反复冻融。
提供50ml 100mg/ml Ampicillin氨苄青霉素溶液完整配制方案:5g Ampicillin灭菌水定容至50ml,0.22μm过滤除菌后小份分装-20℃保存。适用于LB培养基中抗性筛选,无菌操作,避免反复冻融。
提供1L 5M NaCl高盐溶液完整配制方案:292.2g NaCl定容至1L,高压灭菌后4℃保存。适用于细胞培养、缓冲液配制、DNA杂交及蛋白纯化等无菌实验,建议小份分装避免污染。
提供100ml 20%葡萄糖溶液完整配制方案:20g Glucose定容至100ml。严禁高温高压灭菌(否则焦化产生毒性),需过滤除菌后4℃保存,是细菌培养基添加和感受态细胞制备的关键母液,发现浑浊即丢弃。
提供1L PBS磷酸盐缓冲液完整配制方案:8g NaCl、0.2g KCl、1.42g Na2HPO4、0.27g KH2PO4,调pH7.4后高压灭菌。适用于细胞培养、免疫组化、Western blot等实验的洗涤和稀释,可根据需要补充CaCl2和MgCl2。
提供1L 0.5M磷酸盐缓冲液(pH 7.2)完整配制方案:134g Na2HPO4·7H2O,85%浓磷酸调至pH7.2,高压灭菌后室温保存。磷酸盐有多种水合物形式,称量前须确认试剂瓶标签,建议在实验温度下校准pH值。
提供1L 10×TBST浓缩洗涤缓冲液完整配制方案:121g Tris碱、55g硼酸、87.66g NaCl、10ml Tween-20,调pH7.5-8.0后高压灭菌。适用于Western blot和ELISA中膜洗涤,有效降低背景信号,使用时10倍稀释,室温可稳定保存3个月。
提供1L 10×PBST浓缩洗涤缓冲液完整配制方案:80g NaCl、2g KCl、14.4g Na2HPO4(或29g十二水合物)、2.4g KH2PO4、10ml Tween-20,调pH7.4后高压灭菌。含Tween-20有效降低非特异性结合,是Western blot和ELISA的核心洗涤液,使用时10倍稀释。
提供1L考马斯亮蓝染色脱色液完整配制方案:100ml冰醋酸、50ml乙醇、850ml去离子水。适用于SDS-PAGE凝胶考马斯亮蓝染色后的背景脱色,需多次更换脱色液直至背景清晰。含醋酸和乙醇,须按有机废液标准处理。