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提供1L考马斯亮蓝R-250蛋白染色液完整配制方案:1g R-250、250ml异丙醇、100ml冰醋酸,定容后滤纸过滤。适用于SDS-PAGE凝胶中蛋白条带的灵敏检测。含异丙醇和冰醋酸,须按有机废液标准处理,严禁直接下水道排放
提供1L 5×Tris-Glycine SDS-PAGE电泳缓冲液完整配制方案:15.1g Tris、94g Glycine、5.0g SDS,定容后室温保存,是蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳的核心运行缓冲液。含SDS废液需按有机溶剂标准处理。
提供20ml 10mM ATP(三磷酸腺苷)溶液完整配制方案:121mg Na2ATP·3H2O溶于25mM Tris-HCl(pH8.0),小份分装后-20℃避光保存。ATP对光敏感,须用棕色管或铝箔包裹,是激酶反应等分子生物学实验的关键能量底物。
提供20ml 1M DTT还原剂完整配制方案:3.09g DTT溶于0.01M NaOAc(pH5.2),0.22μm过滤除菌后小份分装-20℃保存。DTT易被氧化,须一次性使用,避免反复冻融,是蛋白电泳还原型上样缓冲液的关键添加剂。
提供5ml 5×SDS-PAGE Loading Buffer完整配制方案:250mM Tris-HCl pH6.8、10% SDS、0.5% BPB、50%甘油,使用前每小份加入5% β-巯基乙醇。含溴酚蓝指示剂追踪电泳前沿,是蛋白电泳上样核心试剂。β-巯基乙醇具恶臭剧毒,须通风橱内操作。
提供1L 1.5 M Tris-HCl(pH 8.8)缓冲液完整配制方案:181.7g Tris碱,浓盐酸调至pH 8.8,高压灭菌后室温保存,是SDS-PAGE分离胶的核心缓冲体系。含温度补偿提示(每℃变化0.03pH),须冷却至室温后再调定pH值。
提供1L 1 M Tris-HCl缓冲液完整配制方案:121.1g Tris碱,分别以70ml/60ml/42ml浓盐酸调至pH 7.4/7.6/8.0,高压灭菌后室温保存。含温度补偿提示(每℃变化0.03pH),是核酸蛋白实验最常用基础缓冲液。
提供1L 40%高浓度丙烯酰胺制胶液完整配制方案:380g Acrylamide、20g BIS,0.45μm过滤除菌后棕色瓶4℃保存,适用于高分辨率SDS-PAGE及DNA测序凝胶电泳。含神经毒性安全操作警告,配制时须戴手套防护。
提供1L 30%丙烯酰胺制胶液完整配制方案:290g Acrylamide、10g BIS,0.45μm过滤除菌后棕色瓶4℃保存。适用于SDS-PAGE蛋白电泳及核酸凝胶电泳。含神经毒性安全操作警告,配制时须戴手套防护。
提供500ml 50×Denhardt's溶液完整配制方案:5g Ficoll 400、5g PVP-40、5g BSA,过滤除菌后-20℃分装保存。含三种大分子封闭剂,有效封闭核酸杂交中膜的非特异性位点,降低背景,不可高压灭菌。