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10×MOPS缓冲液配制全攻略(1L):称取41.8g MOPS溶于700mL DEPC处理水,用2N NaOH调pH至7.0,加入20mL 1M NaOAc(DEPC处理)和20mL 0.5M EDTA(pH8.0,DEPC处理),定容至1L,0.45μm滤膜过滤,室温避光保存。核心用途:RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳核心缓冲液···
Agarose 凝胶 2026-07-15
琼脂糖凝胶配制全攻略:选择合适缓冲液(0.5×TBE或1×TAE),微波炉加热熔化琼脂糖(注意暴沸风险),冷却至60℃加溴乙锭(终浓度0.5μg/mL),倒胶凝固。附琼脂糖凝胶浓度与线形DNA最佳分辨范围对照表(0.5%~2.0%对应50bp~30kb)。关键提醒:制胶与电泳缓冲···
10×TBE缓冲液配制全攻略(1L):称取108g Tris碱、55g硼酸、7.44g Na₂EDTA·2H₂O,定容至1L,pH自然稳定在8.3,室温保存。使用时稀释10倍(100mL母液定容至1L)即得1×TBE工作液。关键提醒:TBE缓冲容量强于TAE,适合长时间电泳,但硼酸可能抑制酶活性,酶···
50×TAE缓冲液配制全攻略(1L):称取242g Tris碱、37.2g Na₂EDTA·2H₂O,加入57.1mL冰乙酸,定容至1L,室温保存。使用时稀释50倍(20mL母液定容至1L)即得1×TAE工作液。关键提醒:TAE缓冲容量较小,不建议长时间电泳(如过夜);低温出现沉淀属正常现象,···
10×TE Buffer配制全攻略(1L):100mL 1M Tris-HCl(pH7.4/7.6/8.0)+ 20mL 0.5M EDTA(pH8.0),定容至1L,高压灭菌,室温保存。使用时无菌水稀释10倍即为1×TE。关键提醒:用于RNA保存时需用DEPC处理水配制;低温沉淀属正常现象,37℃水浴复溶即可。DNA/RN···
TE缓冲液配制全攻略(100mL):称取0.121g Tris碱(或取1mL 1M Tris-HCl储备液)+ 0.2mL 0.5M EDTA(pH8.0),定容至100mL,调pH至8.0,高压灭菌或过滤除菌。关键提醒:EDTA在pH<8.0时难以溶解,溶液浑浊时调高pH即可变澄清;用于RNA保存必须用DEPC处理水配制···
10M醋酸铵配制全攻略(100mL):称取77.1g醋酸铵溶于30mL去离子水,定容至100mL,0.22μm滤器过滤除菌,密封室温保存。核心用途:RNA乙醇沉淀辅助试剂。关键提醒:醋酸铵受热易分解,不可高温高压灭菌,必须采用过滤除菌。实验室高浓度盐溶液配制必读。
3M醋酸钠配制全攻略(100mL):称取40.8g NaOAc·3H2O溶于40mL去离子水,用冰醋酸调pH至5.2,定容至100mL,高压灭菌后室温保存。关键提醒:低温出现沉淀属正常现象,37℃水浴复溶即可恢复澄清。DNA乙醇沉淀辅助试剂配制必读
0.5M EDTA配制全攻略(1L):称取186.1g Na2EDTA·2H2O溶于800mL去离子水,用NaOH调节pH至8.0(约需20g)使EDTA完全溶解,定容至1L,分装后高压灭菌,室温保存。核心原理:EDTA在pH<7.0时几乎不溶,只有pH达到8.0才能完全解离溶解。如4℃出现结晶,37℃水浴复···
2.5N HCl配制全攻略(100mL):取78.4mL去离子水,缓慢加入21.6mL浓盐酸(11.6N),边加边搅拌,混匀后室温保存。关键提醒:浓盐酸具强腐蚀性和挥发性,必须在通风橱中操作,严格遵守“酸入水”规则,佩戴防护眼镜和防腐蚀手套。实验室基础试剂配制必读。